SHRNUTÍ A VYSVĚTLENÍ TESTU
Viry dengue, rodina čtyř odlišných sérotypů virů (Den 1,2,3,4), jsou jednokmenové, obalené RNA viry s pozitivním smyslem.Viry jsou přenášeny komáry z čeledi Stegemyia kousavými, hlavně Aedes aegypti a Aedes albopictus.Dnes je více než 2,5 miliardy lidí žijících v oblastech tropické Asie, Afriky, Austrálie a Ameriky ohroženo infekcí horečkou dengue.Odhaduje se, že na celém světě se ročně objeví 100 milionů případů horečky dengue a 250 000 případů život ohrožující hemoragické horečky dengue1-3.
Sérologická detekce IgM protilátek je nejběžnější metodou pro diagnostiku infekce virem dengue.V poslední době ukazuje velmi slibný výsledek detekce antigenů uvolněných při replikaci viru u infikovaného pacienta.Umožňuje diagnostiku od prvního dne po vypuknutí horečky až do 9. dne, po ukončení klinické fáze onemocnění, a umožňuje tak včasnou léčbu nasadit rychle4-. Rychlý test dengue IgG/IgM je vyvinut pro detekci cirkulujícího antigenu dengue v séru, plazmě nebo plné krvi.Test může provádět nevyškolený nebo minimálně kvalifikovaný personál, bez laboratorního vybavení.
ZÁSADA
Rychlý test dengue IgG/IgM je laterální průtoková chromatografická imunoanalýza.Testovací kazeta se skládá z: 1) vínově zbarveného konjugátu obsahujícího rekombinantní obalové antigeny horečky dengue konjugované s koloidním zlatem (konjugáty horečky dengue) a konjugáty králičího IgG-zlato, 2) proužku s nitrocelulózovou membránou obsahující dva testovací proužky (proužky G a M) a kontrolní proužek (proužek C).Pás G je předem potažen protilátkou pro detekci IgG anti-dengue viru, M pás je potažen protilátkou pro detekci IgM anti-dengue viru a C pás je předem potažen kozím anti-králičím IgG.
Když se do jamky na vzorek testovací kazety nadávkuje adekvátní objem testovacího vzorku, vzorek migruje kapilárním působením přes kazetu.IgG virus proti horečce dengue, pokud je ve vzorku přítomen, se naváže na konjugáty horečky dengue.Imunokomplex je poté zachycen činidlem potaženým na proužku G, čímž se vytvoří vínově zbarvený proužek G, což ukazuje na pozitivní výsledek testu IgG viru dengue a naznačuje nedávnou nebo opakovanou infekci.IgM virus proti horečce dengue, pokud je ve vzorku přítomen, se naváže na konjugáty horečky dengue.Imunokomplex je poté zachycen činidlem předem potaženým na proužku M, čímž se vytvoří vínově zbarvený pruh M, což ukazuje na pozitivní výsledek testu na IgM viru dengue a naznačuje čerstvou infekci.
Nepřítomnost jakýchkoliv testovacích proužků (G a M) naznačuje negativní výsledek. Test obsahuje vnitřní kontrolu (proužek C), který by měl vykazovat vínově zbarvený proužek imunokomplexu kozího anti králičího IgG/králičího IgG-zlatého konjugátu bez ohledu na vývoj barvy na kterémkoli z proužků T.V opačném případě je výsledek testu neplatný a vzorek musí být znovu testován jiným zařízením.
