Detailní popis
Běžné metody pro detekci protilátek proti AIDS jsou:
1. Detekce patogenu
Detekce patogenů se týká především přímé detekce virů nebo virových genů z hostitelských vzorků izolací a kultivací viru, elektronovým mikroskopickým pozorováním morfologie, detekcí virového antigenu a stanovením genu.První dvě metody jsou obtížné a vyžadují speciální vybavení a profesionální techniky.Proto lze pro klinickou diagnostiku použít pouze detekci antigenu a RT-PCR (reverzní transkripční PCR).
2. Detekce protilátek
Protilátka proti HIV v séru je nepřímým indikátorem infekce HIV.Podle hlavního rozsahu použití lze stávající metody detekce protilátek proti HIV rozdělit na screeningový test a konfirmační test.
3. Potvrzovací činidlo
Western blot (WB) je nejčastěji používanou metodou k potvrzení pozitivního séra screeningového testu.Vzhledem k relativně dlouhé době okna, nízké citlivosti a vysoké ceně je tato metoda vhodná pouze pro konfirmační test.Se zlepšením citlivosti diagnostických činidel třetí a čtvrté generace HIV se WB stále více stává neschopným splnit požadavky pro jeho použití jako konfirmačního testu.
Dalším typem screeningového potvrzovacího činidla schváleného FDA je imunofluorescenční test (IFA).IFA stojí méně než WB a ovládání je poměrně jednoduché.Celý proces lze dokončit během 1-1,5 hodiny.Hlavní nevýhodou této metody je, že vyžaduje drahé fluorescenční detektory a zkušené odborníky k pozorování výsledků hodnocení a výsledky experimentů nelze dlouhodobě uchovat.Nyní FDA doporučuje, aby negativní nebo pozitivní výsledky IFA převažovaly při vydávání konečných výsledků dárcům, jejichž WB nelze určit, ale není to považováno za standard pro kvalifikaci krve.
4. Screeningový test
Screeningový test se používá především ke screeningu dárců krve, proto vyžaduje jednoduchou obsluhu, nízkou cenu, citlivost a specificitu.V současnosti je hlavní screeningovou metodou ve světě stále ELISA a existuje několik aglutinačních činidel a rychlých činidel ELISA.
ELISA má vysokou senzitivitu a specificitu a snadno se ovládá.Lze jej aplikovat pouze v případě, že je laboratoř vybavena čtečkou mikrodestiček a myčkou destiček.Je vhodný zejména pro plošný screening v laboratoři.
Test aglutinace částic je další jednoduchá, pohodlná a levná metoda detekce.Výsledky této metody lze posoudit pouhým okem a citlivost je velmi vysoká.Je vhodný zejména pro rozvojové země nebo velké množství dárců krve.Nevýhodou je, že musí být použity čerstvé vzorky a specifičnost je špatná.
Klinické protilátky proti viru hepatitidy C:
1) 80-90% pacientů trpících hepatitidou po krevní transfuzi je hepatitida C, většina z nich je pozitivních.
2) U pacientů s hepatitidou B, zejména těch, kteří často užívají krevní produkty (plazma, plná krev), mohou způsobit souběžnou infekci virem hepatitidy C, čímž se onemocnění stane chronickým, cirhózou jater nebo rakovinou jater.Proto by měla být HCV Ab detekována u pacientů s recidivující hepatitidou B nebo pacientů s chronickou hepatitidou.