SHRNUTÍ A VYSVĚTLENÍ TESTU
Malárie je hemolytické horečnaté onemocnění přenášené komáry, které infikuje více než 200 milionů lidí a ročně zabije více než 1 milion lidí.Je způsobena čtyřmi druhy Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale a P. malariae.Všechny tyto plasmodia infikují a ničí lidské erytrocyty, což způsobuje zimnici, horečku, anémii a splenomegalii.P. falciparum způsobuje závažnější onemocnění než ostatní plasmodiální druhy a odpovídá za většinu úmrtí na malárii a je jedním ze dvou nejčastějších patogenů malárie.
Tradičně je malárie diagnostikována demonstrací organismů na Giemsa obarvených tlustých nátěrech periferní krve a různé druhy plasmodií se odlišují svým výskytem v infikovaných erytrocytech.Technika je schopna přesné a spolehlivé diagnózy, ale pouze tehdy, je-li prováděna zkušenými mikroskopy pomocí definovaných protokolů, což představuje velké překážky pro vzdálené a chudé oblasti světa.
Pro řešení těchto překážek je vyvinut Pf Ag Rapid Test.Detekuje Pf specifický antigen pHRP-II ve vzorku lidské krve.Může ji provádět nevyškolený nebo minimálně kvalifikovaný personál, bez laboratorního vybavení.
ZÁSADA
Pf Ag Rapid Test je laterální průtoková chromatografická imunoanalýza.Komponenty testovacího proužku se skládají z: 1) vínově zbarveného polštářku konjugátu obsahujícího monoklonální protilátku proti pHRP-II konjugovanou s koloidním zlatem (konjugáty pHRP II-zlato), 2) proužku s nitrocelulózovou membránou obsahující testovací proužek (Pf) a kontrolní proužek (proužek C).Pás Pf je předem potažen polyklonálními protilátkami proti pHRP-II a pás C je předem potažen kozím anti-myším IgG.
Během testu se do jamky pro vzorek (S) testovací kazety nadávkuje adekvátní objem krevního vzorku, do jamky s pufrem (B) se přidá lyzační pufr.Pufr obsahuje detergent, který lyžuje červené krvinky a uvolňuje antigen pHRPII, který migruje kapilárním působením přes proužek držený v kazetě.Pokud je pHRP-II přítomen ve vzorku, naváže se na konjugáty pHRP II-zlato.Imunokomplex je poté zachycen na membráně předem potaženými polyklonálními antipHRP II protilátkami, čímž se vytvoří vínově zbarvený Pf pás, indikující Pf pozitivní výsledek testu.
Absence pásma Pf naznačuje negativní výsledek.Test obsahuje vnitřní kontrolu (proužek C), který by měl vykazovat vínově zbarvený proužek imunokomplexu kozího anti-myšího IgG / myšího IgG (konjugáty pHRP II – zlato) bez ohledu na vývoj barvy na kterémkoli z Pf pruhu.V opačném případě je výsledek testu neplatný a vzorek musí být znovu testován jiným zařízením.
