SHRNUTÍ A VYSVĚTLENÍ TESTU
Malárie je hemolytické horečnaté onemocnění přenášené komáry, které infikuje více než 200 milionů lidí a ročně zabije více než 1 milion lidí.Je způsobena čtyřmi druhy Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale a P. malariae.Všechny tyto plasmodia infikují a ničí lidské erytrocyty, což způsobuje zimnici, horečku, anémii a splenomegalii.P. falciparum způsobuje závažnější onemocnění než jiné plasmodiální druhy a odpovídá za většinu úmrtí na malárii.P. falciparum a P. vivax jsou nejběžnějšími patogeny, nicméně existují značné geografické rozdíly v rozšíření druhů.
Tradičně je malárie diagnostikována demonstrací organismů na Giemsa obarvených tlustých nátěrech periferní krve a různé druhy plasmodií se odlišují svým výskytem v infikovaných erytrocytech.Technika je schopna přesné a spolehlivé diagnózy, ale pouze tehdy, je-li prováděna zkušenými mikroskopy pomocí definovaných protokolů, což představuje velké překážky pro vzdálené a chudé oblasti světa.
Pro řešení těchto překážek je vyvinut Rapid Test Malaria Pf/Pv Ag.Využívá protilátky specifické pro protein II bohatý na histidin (pHRP-II) P. falciparum a laktátdehydrogenázu (Pv-LDH) z P. vivax k současné detekci a odlišení infekce P. falciparum a P. vivax.Test může provádět nevyškolený nebo minimálně kvalifikovaný personál, bez laboratorního vybavení
ZÁSADA
Malaria Pf/Pv Ag Rapid Test je laterální průtoková chromatografická imunoanalýza.Komponenty proužkového testu se skládají z: 1) vínově zbarvené konjugátové podložky obsahující myší anti-Pv-LDH protilátku konjugovanou s koloidním zlatem (konjugáty Pv-LDH-zlato) a myší anti-pHRP-II protilátku konjugovanou s koloidním zlatem (konjugáty pHRP-II-zlato), 2) testovací nitrocelulózový proužek (proužek s kontrolní nitrocelulózou) a proužek s kontrolní nitrocelulózovou membránou (PfC).Pás Pv je předem potažen další myší specifickou protilátkou anti-Pv-LDH pro detekci infekce Pv, pás Pf je předem potažen polyklonálními protilátkami anti-pHRP-II pro detekci infekce Pf a pás C je potažen kozím anti-myším IgG.
Během testu se do jamky pro vzorek (S) testovací kazety nadávkuje adekvátní objem krevního vzorku, do jamky s pufrem (B) se přidá lyzační pufr.Pufr obsahuje detergent, který lyžuje červené krvinky a uvolňuje různé antigeny, které migrují kapilárním působením přes proužek držený v kazetě.Pv-LDH, pokud je ve vzorku přítomen, se bude vázat na konjugáty Pv-LDH-zlato.Imunokomplex je poté zachycen na membráně předem potaženou anti-Pv-LDH protilátkou, čímž se vytvoří vínově zbarvený Pv pás, což indikuje Pv pozitivní výsledek testu.Alternativně se pHRP-II, pokud je ve vzorku přítomen, naváže na konjugáty pHRP-II-zlato.Imunokomplex je poté zachycen na membráně předem potaženými anti-pHRP-II protilátkami, čímž se vytvoří vínový pruh Pf, což ukazuje na Pf pozitivní výsledek testu.Absence jakýchkoli testovacích proužků naznačuje negativní výsledek.Test obsahuje vnitřní kontrolu (proužek C), který by měl vykazovat vínově zbarvený proužek imunokomplexu kozího anti-myšího IgG / myšího IgG (anti-Pv-LDH a anti-pHRPII)-zlatého konjugátu bez ohledu na vývoj barvy na kterémkoli z testovacích proužků.V opačném případě je výsledek testu neplatný a vzorek musí být znovu testován jiným zařízením.
