SHRNUTÍ A VYSVĚTLENÍ TESTU
Chikungunya je vzácná virová infekce přenášená kousnutím infikovaného komára Aedes aegypti.Je charakterizována vyrážkou, horečkou a silnou bolestí kloubů (artralgie), která obvykle trvá tři až sedm dní.Název je odvozen od slova Makonde, které znamená „to, co se ohýbá“ ve vztahu ke shrbenému držení těla vzniklému v důsledku artritických příznaků nemoci.Vyskytuje se v období dešťů
v tropických oblastech světa, především v Africe, jihovýchodní Asii, jižní Indii a Pákistánu.Příznaky jsou nejčastěji klinicky nerozlišitelné od příznaků pozorovaných u horečky dengue.V Indii byla skutečně hlášena duální infekce dengue a chikungunya.Na rozdíl od horečky dengue jsou hemoragické projevy relativně vzácné a nejčastěji se jedná o samolimitující horečnaté onemocnění.Proto je velmi důležité
ke klinickému rozlišení horečky dengue od infekce CHIK.CHIK je diagnostikována na základě sérologické analýzy a izolace viru u myší nebo tkáňové kultury.Imunoanalýza IgM je nejpraktičtější laboratorní testovací metodou.Rychlý test Chikungunya IgG/IgM využívá rekombinantní antigeny odvozené z jeho strukturního proteinu, detekuje IgG/IgM anti-CHIK v séru nebo plazmě pacienta během 20 minut.Zkoušku může provést neškolený popř
minimálně kvalifikovaný personál, bez těžkopádného laboratorního vybavení.
ZÁSADA
Rychlý test Chikungunya IgG/IgM+NS1 antigenu je laterální průtoková chromatografická imunoanalýza.Testovací kazeta se skládá z IgG/IgM stripu a NS1 stripu.
IgG/IgM proužek: 1) vínově zbarvený konjugátový polštářek obsahující rekombinantní obalové antigeny Chikungunya konjugované s koloidním zlatem (konjugáty horečky dengue) a králičí IgG-zlaté konjugáty,2) proužek s nitrocelulózovou membránou obsahující dva testovací proužky (proužky G a M) a kontrolní pásmo (pásmo C).Pás G je předem potažen protilátkou pro detekci IgG anti-Chikungunya viru, M pás je potažen protilátkou pro detekci IgM anti-Chikungunya viru a pás C je předem potažen kozím anti-králičím IgG.
Proužek NS1: 1) vínově zbarvený konjugátový polštářek obsahující myší anti-Chikungunya NS1 antigen konjugovaný s koloidním zlatem (konjugáty Chikungunya Ab), 2) proužek s nitrocelulózovou membránou obsahující testovací proužek (proužek T) a kontrolní proužek (proužek C).Pás T je předem potažen králičím anti-Chikungunya NS1 antigenem a pás C je předem potažen kozí anti-myší IgG protilátkou.
Proužek IgG/IgM: Když se do jamky na vzorek testovací kazety nadávkuje adekvátní objem testovacího vzorku, vzorek migruje kapilárním působením přes kazetu.IgG anti-Chikungunya virus, pokud je ve vzorku přítomen, se naváže na konjugáty Chikungunya.Imunokomplex je poté zachycen činidlem potaženým na proužku G, čímž se vytvoří vínově zbarvený proužek G, což ukazuje na pozitivní výsledek testu na IgG viru Chikungunya a naznačuje nedávnou nebo opakovanou infekci.IgM anti-Chikungunya virus, pokud je ve vzorku přítomen, se naváže na konjugáty Chikungunya.Imunokomplex je poté zachycen činidlem předem potaženým na proužku M, čímž se vytvoří vínově zbarvený pruh M, což ukazuje na pozitivní výsledek testu na IgM viru Chikungunya a naznačuje čerstvou infekci.Nepřítomnost jakýchkoliv testovacích proužků (G a M) naznačuje negativní výsledek. Test obsahuje vnitřní kontrolu (proužek C), která by měla vykazovat vínově zbarvený proužek imunokomplexu kozího anti králičího IgG/
králičí IgG-zlato konjugát bez ohledu na vývoj barvy na kterémkoli z T pásů.V opačném případě je výsledek testu neplatný a vzorek musí být znovu testován jiným zařízením.
Proužek NS1: Když je do jamky na vzorek v kazetě nadávkován adekvátní objem testovacího vzorku, vzorek migruje kapilárním působením přes testovací kazetu.Chikungunya NS1 Ag, pokud je ve vzorku přítomen, se naváže na konjugáty Chikungunya Ab.Imunokomplex je poté zachycen na membráně předem potaženou králičí anti-NS1 protilátkou, čímž se vytvoří vínově zbarvený T pás, což indikuje pozitivní výsledek testu Chikungunya Ag.Absence T pásma naznačuje negativní výsledek.Test obsahuje vnitřní kontrolu (proužek C), který by měl vykazovat vínově zbarvený pruh imunokomplexu kozího anti-myšího IgG/myšího IgG-zlatého konjugátu bez ohledu na přítomnost barevného T pruhu.V opačném případě je výsledek testu neplatný a vzorek musí být znovu testován jiným zařízením.
